Анализы кала виды


виды и расшифровка их результатов

Общий анализ кала представляет собой один из наиболее достоверных методов определения нарушений функций органов ЖКТ. Копрограмма способна определить качественный состав массы для выявления состояния процессов пищеварения организма и определения ряда заболеваний желудка, поджелудочной железы, кишечника, печени и желчного пузыря. При этом анализ кала способен определять наличие паразитарных болезней, к примеру, лямблиоза и других.

Цель и правильный сбор анализов

Кал — это конечный продукт переваривания пищи человеческим организмом. Формирование окончательного продукта характеризуется путем прохождения принятой человеком пищи через всю пищеварительную систему, что представляет собой сбор информации касательно функционирования буквально всех органов пищеварения. Нормальное состояние кала подразумевает наличие большого количества бактерий, непереваренных остатков употребляемых продуктов, слизи и некоторых пигментов, за счет которых формируется определенный цвет и некоторое количество клеток, покрывающих стенки кишечника.

Если сдавать копрограмму при наличии каких-либо заболеваний, будут обнаружены отклонения от нормы, что укажет, какой из этапов пищеварения по анализу кала был нарушен. Главное — это правильно подготовиться к такой процедуре, соблюдая все общие рекомендации, то есть сдавать анализы согласно указаниям специалистов. Перед сбором человек должен на протяжении 2-3 дней соблюдать специальную диету — не употреблять мясной и рыбной продукции, овощей и лекарственных препаратов. Также перед сбором кала необходимо в обязательном порядке тщательно промывать область промежности, а женщинам не делать сбор в дни менструации, поскольку анализ может показать в итоге неточность результатов.

Если была назначена рентгенология пищеварительной системы, где используют сульфат бария, или исследование толстой кишки, анализ кала не рекомендуется проводить ранее 2-х дней после такой процедуры.

Копрограмма должна исследовать конечный продукт самопроизвольной дефекации, то есть без использования слабительных препаратов, которые могут ускорить этот процесс. Образец должен быть без примесей посторонних веществ: слабительных средств, мочи или менструальных выделений. Собирать кал необходимо шпателем в пластиковый стерилизованный контейнер. Сколько понадобится кала для анализа? Примерно 1 чайная ложка. Материал необходимо собирать в день сдачи.

После того как рассмотрели, как сдавать анализы, давайте разберемся с их разновидностями, предназначением и расшифровкой.

Разновидность анализов

Исследуют анализ кала в лаборатории по нескольким параметрам, где каждый метод может выявить или указать на определенное заболевание пищеварительной системы. Для начала назначают общий анализ кала, норма которого подразумевает плотную консистенцию коричневого цвета без резких/посторонних запахов. Ненормальный анализ может показать содержание в материале слизи, крови или остатков непереваренных продуктов.

Если первая процедура показывает какие-либо отклонения, пациента направляют на сдачу анализов по специальным методам, благодаря которым выявляются скрытые факторы нарушений. Бывают пробы на определение скрытой крови, белков, билирубина и стеркобилина. Норма должна показать отрицательный результат пробы крови, билирубина и белков, а положительный — при исследовании вида анализа на стеркобилин. Специальные способы исследования материала производят с помощью микроскопа и специальных веществ.

Основные виды копрограммы:

  1. Анализы на дисбактериоз назначают с целью определения состояния микрофлоры кишечника. Такая копрограмма описывает уровень соотношения патогенных, условно-патогенных и «полезных» микроорганизмов. Этот анализ показан при проявлении неустойчивого стула, наличии кишечных инфекций и для выявления уровня отклонений от нормы биоценоза кишечника.
  2. Копрограмма кала на энтеробиоз необходима для того, чтобы подтвердить факт наличия яиц остриц или же исключить данный риск. Проводят ее при проявлении кишечных расстройств и зуда около анального отверстия. Потребность в таком исследовании очень часто возникает при оформлении в учебное заведение или для госпитализации в больницу.
  3. Копрограмма на яйцеглисты — это исследование, в ходе которого устанавливается наличие/отсутствие гельминтов. Последние, в свою очередь, могут стать причиной множества болезней, которые в медицине называют гельминтозами.
  4. Биохимический анализ кала проводят с целью выявление «скрытой» крови, которую обнаружить можно лишь с помощью микроскопа. Биохимический анализ назначают при подозрении на наличие внутреннего кровотечения отделов желудочно-кишечного тракта.
  5. Анализ на углеводы — это исследование, назначаемое в основном детям до 1 года, за счет которого устанавливается наличие лактозной недостаточности.

Результаты анализов

Когда человек по направлению сдает анализы, его материал в лаборатории поддается исследованию сразу по нескольким параметрам. Очень часто перечень необходимых анализов определяет, сколько потребуется специалистам, в целом и по отдельности, материала для проведения полной его диагностики. К примеру, биохимический анализ требует около 30% наполненности специальной пластиковой тары.

Как уже ранее упоминалось, сначала исследуют в лаборатории общий вид материала, после его изучают специальными способами и в завершение исследуют микроскопом.

Анализы по специальным методам позволяют выявлять скрытую кровь, пигменты, белки, где обнаруженные нарушения определяют по характерному цвету обследуемого материала, указывающему на работу печени и желчного пузыря. Исследование материала под микроскопом позволяет обнаружить не переваренные мышечные волокна, жировые включения, крахмал, а также лейкоциты, эритроциты и т. п.

Анализ кала у здоровых людей не покажет наличие дрожжевых грибов, яиц глист и прочих паразитов. Расшифровка анализов — это некий путеводитель для врачей, помогающий ставить верный диагноз о наличии того или иного заболевания, поскольку обнаруженные изменения показателей в кале свидетельствуют об определенных нарушениях и отклонениях.

CDC - DPDx - диагностические процедуры

Schistosoma mansoni 140 мкм х 66 мкм. Диапазон, 114-180 мкм х 45-73 мкм. Удлиненный с выдающимся боковым позвоночником у заднего конца. Передний конец конусообразный и слегка изогнутый. Желтый или желто-коричневый. В зачаточном состоянии. Содержит зрелый мирацид. Боковой отдел позвоночника. Найдено в кале; в редких случаях также в моче. Яйца выбрасываются с нерегулярными интервалами и могут быть обнаружены не в каждом образце стула.Редки в хронических стадиях инфекции.
Schistosoma japonicum 90 мкм х 70 мкм. Диапазон, 68-100 мкм х 45-80 мкм. овал Маленький боковой позвоночник часто виден или может выглядеть как маленький крючок или «ручка», расположенная в углублении в раковине. Желтый или желто-коричневый. В зачаточном состоянии. Содержит зрелый мирацид. Найдено в Кале. Часто покрыты мусором и могут быть пропущены.
Schistosoma haematobium 143 мкм х 60 мкм.Диапазон 112-170 мкм х 40-70 мкм. Удлиненный с закругленным передним концом и терминальным позвоночником на заднем конце. Желтый или желто-коричневый. В зачаточном состоянии. Содержит зрелый мирацид. Терминал позвоночника. Найдено в моче, иногда в кале. Яйцо часто покрыто мусором.
Schistosoma intercalatum 175 мкм х 60 мкм. Диапазон 140-240 мкм х 50-85 мкм. Удлиненный с коническим передним концом и концевым отделом позвоночника.Иногда «веретенообразный». Желтый или желто-коричневый. В зачаточном состоянии. Содержит зрелый мирацид. Терминал позвоночника длинный, тонкий с загнутым кончиком. Напоминает яйцо S. haematobium за исключением того, что оно длиннее, тоньше и имеет более длинный позвоночник. Найдено в Кале. Может иметь мусор, прилипший к раковине.
Schistosoma mekongi 69 мкм x 56 мкм * Диапазон, 51-73 мкм x 39-66 мкм. Сферический. Небольшой боковой отдел позвоночника, не всегда видимый или может выглядеть как небольшая «ручка» в углублении в раковине. Желтый или желто-коричневый. В зачаточном состоянии. Содержит зрелый мирацид. Найдено в Кале. Близко напоминает S. japonicum яйцо, за исключением того, что оно меньше. Может быть покрыт мусором.
Clonorchis sinensis 30 мкм x 16 мкм. Диапазон, 27-35 мкм х 11-20 мкм. Маленький, яйцевидный или удлиненный с широким закругленным задним концом и выпуклой жаберной опорой, опирающейся на «плечи». Небольшая «ручка» может быть видна на заднем конце. желто-коричневый. В зачаточном состоянии. Содержит зрелый мирацид. Маленький размер, жаберная головка и «ручка» на заднем конце. Оболочка часто покрыта прилипшим мусором.
Opisthorchis spp. 30 мкм х 12 мкм. Диапазон, 26-30 мкм х 11-15 мкм. Удлиненный с жаберной крышкой на переднем конце и заостренной терминальной «ручкой» на заднем конце. желто-коричневый. В зачаточном состоянии. Содержит зрелый мирацид. Отсутствует выпуклые плечи, характерные для Clonorchis , и имеет более конический конец.
гетерофины гетерофиты 28 мкм х 15 мкм. Диапазон, 28-30 мкм х 15-17 мкм. Маленький, удлиненный или слегка яйцевидный. Крышечка. Небольшая «ручка» на заднем конце. желто-коричневый. В зачаточном состоянии. Содержит зрелый мирацид. напоминает яйцо Клонорхиса , но с менее выраженными плечами. Жаберная шишка шире, чем в Clonorchis .
Metagonimus yokogawai 28 мкм x 17 мкм.Диапазон, 26-30 мкм х 15-20 мкм. Маленький, удлиненный или яйцевидный. Крышечка. Нет «плечи» на переднем конце. Маленькая «ручка» часто видна на заднем конце. Желтый или желто-коричневый. В зачаточном состоянии. Содержит зрелый мирацид. напоминает Clonorchis и Heterophyes яиц. Оболочка немного тоньше, чем у Гетерофии . Жаберная шишка шире, чем Clonorchis .
Paragonimus westermani 85 мкм х 53 мкм.Диапазон, 68-118 мкм х 39-67 мкм. Овальные или удлиненные с толстой оболочкой. Жаберная мышца слегка сплющена и вписывается в область плеча раковины. Задний конец утолщен. Яйцо часто асимметричное, одна сторона слегка сплюснута. От желтого до темно-коричневого. Безоблачный. Наполнен желточным материалом, в который заложена зародышевая клетка. Клетки неправильного размера. Найдено в мокроте, иногда в кале. Напоминает яйцо D. latum , но оно крупнее, слегка асимметрично, а жаберная клетка меньше и более плоская.Самая широкая часть яйца Paragonimus обычно предшествует центру; в D. latum самая широкая область вокруг центра.
Fasciola hepatica 145 мкм х 80 мкм. Диапазон, 120-150 мкм х 63-90 мкм. Эллипсоидальная, тонкая оболочка. Маленькая нечеткая жаберная кисть. От желтого до светло-коричневого. Безоблачный. Заполнены клетками желтка, в которые встроена нечеткая зародышевая клетка. Большой размер.Широко овальные яйца.
Fasciolopsis buski 140 мкм х 80 мкм. Диапазон, 130-159 мкм х 78-98 мкм. Эллипсоидальная, тонкая оболочка. Маленькая нечеткая жаберная кисть. желто-коричневый. Безоблачный. Заполнены клетками желтка, в которые встроена нечеткая зародышевая клетка. Большой размер. Напоминает яйцо F. hepatica и не может быть легко отличено от Fasciola .
.

CDC - DPDx - диагностические процедуры

Модифицированная кислотостойкая процедура окрашивания

Этот метод полезен для идентификации ооцист кокцидийных видов ( Cryptosporidium , Cystoisospora и Cyclospora ), которые может быть трудно обнаружить с помощью обычных пятен, таких как трихром. В отличие от кислотно-быстрого красителя Ziehl-Neelsen, это окрашивание не требует нагревания реагентов для окрашивания.

Образец:

Можно использовать концентрированный осадок свежего или консервированного в формалине стула.Другие типы клинических образцов, такие как дуоденальная жидкость, желчь, легочные образцы (индуцированная мокрота, промывание бронхов, биопсия) также могут быть окрашены.

Реагенты:

Эта процедура состоит из четырех этапов, требующих следующих решений:

  1. Абсолютный метанол
  2. Кислота Спирт: 10 мл Серная кислота + 90 мл Абсолютный этанол. Хранить при комнатной температуре.
  3. Kinyoun's Carbol fuchsin: можно приобрести в коммерческих целях.
  4. 3% малахитовый зеленый: растворить 3 г малахитового зеленого в 100 мл дистиллированной воды.Хранить при комнатной температуре.
Процедура:
  1. Приготовьте мазок с 1-2 каплями образца на предметном стекле и высушите на нагревателе для предметных стекол при 60 ° C до сухого состояния. Не делайте мазки слишком густыми!
  2. Fix с абсолютным метанолом в течение 30 секунд.
  3. Окрасьте фибсином Киньюна в течение одной минуты. Немного промыть дистиллированной водой и процедить.
  4. Destain с кислым спиртом в течение 2 минут. Промыть дистиллированной водой и процедить.
  5. Контрстейн с малахитовым зеленым в течение 2 минут.Немного промыть дистиллированной водой и процедить.
  6. Сушить на предметном стекле при температуре 60 ° С в течение 5 минут. Смонтируйте с помощью покровного стекла, используя желаемый монтажный материал
  7. Изучите от 200 до 300 полей, используя 40-кратные или более высокие цели. Чтобы подтвердить внутреннюю морфологию, используйте 100-кратный масляный иммерсионный объектив.
Контроль качества:

Контрольный слайд Cryptosporidium spp. из 10% образца, консервированного в формалине, следует включать в каждый цикл окрашивания. Cryptosporidium spp.пятна розовато-красного цвета. Фон должен равномерно окрашиваться в зеленый цвет.

Процедура окрашивания хромотропом

Этот метод окрашивания был разработан в CDC с использованием различных компонентов метода окрашивания трихромом для дифференциации спор микроспоридий от фоновых фекальных элементов.

Образец:

Готовят тонкий мазок, используя приблизительно 10 мкл 10% суспензии 10% фиксированного формалина в стуле (неконцентрированной) на предметном стекле. Концентраты формалина также могут быть использованы, но количество организмов будет по существу таким же, как до концентрации.Подогревайте на предметном стекле при 60 ° С до полного высыхания (5-10 минут).

Реагенты:

Эта процедура состоит из шести этапов, требующих следующих решений:

  1. Абсолютный метанол
  2. Хромотропное пятно:
    Хромотроп 2R 6,00 г
    Быстро зеленый 0,15 г
    Фосфорновольфрамовая кислота 0,70 г
    Ледяная уксусная кислота 3.00 мл

    Смешать ингредиенты и дать постоять 30 минут. Затем добавьте 100 мл дистиллированной воды. Готовьте свежие для использования каждый месяц.

  3. Кислотный спирт:
    90% этанол 995,5 мл
    Ледяная уксусная кислота 4,5 мл
  4. 95% этанол
  5. 100% этанол
  6. ксилол или ксилоловый заменитель
Процедура:
  1. Фикс мазка в абсолютном метаноле на 5 минут.
  2. Поместить в хромотропное пятно на 90 минут.
  3. Десант в кислом спирте только от 1 до 3 секунд.
  4. Промыть в 95% этаноле окунанием.
  5. Место в двух сменах 100% этанола по 3 минуты каждая.
  6. Поместите в две смены ксилола или ксилолового заменителя по 10 минут каждая.
  7. Слейте задвижку и закрепите ее покровным стеклом, используя монтажный носитель (например, перманент). Изучите мазок после сушки, используя не менее 100-кратного погружения в масло или выше. Изучите не менее 200–300 нефтяных иммерсионных месторождений.
Контроль качества:

Контрольный слайд микроспоридии из 10% образца, консервированного в формалине, должен быть включен в каждый цикл окрашивания. Стенки спор микроспоридий окрашивают в розовато-красный цвет и составляют около 1 мкм. Замените все растворы после окрашивания хромотропом после каждых 10 слайдов, чтобы обеспечить правильное полоскание и обезвоживание. Микроскоп с хорошей оптикой рекомендуется для точности. Используйте по крайней мере 100-кратное увеличение объектива масла для обнаружения организмов; Чем выше увеличение, тем лучше.Из-за сложности идентификации этих небольших спор рекомендуется, чтобы второй читатель подтвердил положительный диагноз.

Процедура быстрого окрашивания грамм-хромотропа

Это альтернативное окрашивание хромотропной процедуры, которое является быстрым, надежным и простым методом окрашивания мазков для демонстрации спор микроспоридий в кале и других клинических образцах.

Образец:

Подготовьте тонкий мазок материала для окрашивания (например, кала, мочи, мокроты, слюны и супернатанта клеточных культур) и высушите на воздухе.

Для фиксированных формалином срезов в парафиновых тканях депарафинизировать, как обычно, увлажнить в ряду спиртов и довести предметные стекла до воды перед нанесением окраски по Граму.

Реагенты:
  1. Gram Stain Kit
  2. Хромотропное пятно:
    Хромотроп 2R 1,0 г
    Быстро зеленый 0,15 г
    Фосфорновольфрамовая кислота 0.25 г
    Ледяная уксусная кислота 3,0 мл

    Смешать сухие ингредиенты, затем добавить уксусную кислоту. Оставьте на 30 минут, затем добавьте 100 мл дистиллированной воды. Готовьте свежие для использования каждый месяц.

  3. Кислотный спирт:
    90% этанол 995,5 мл
    Ледяная уксусная кислота 4,5 мл
  4. 95% этанол
  5. 100% этанол

Примечание: В дополнение к перечисленным реагентам требуется метод нагревания реагентов и поддержания определенной температуры.Поскольку нагревать нужно только хромотропное пятно, достаточно горячей плиты.

Процедура:
  1. Мазок с горячей фиксацией (3 раза в течение 1 секунды при слабом пламени или 5 минут на предметном стекле, установленном на 60 ° C). Остудить до комнатной температуры.
  2. Выполните окрашивание по Граму, исключив шаг сафранина, следующим образом:
    1. Затопите раствор в раствор горечавки и оставьте на 30 секунд. Для срезов ткани увеличьте время до 1 минуты.
    2. Аккуратно смойте лишнее пятно водой.
    3. Flood помещается в раствор йода Грама и позволяет оставаться на предметном стекле в течение 30 секунд. Для срезов ткани увеличьте время до 1 минуты.
    4. Удалите раствор йода Грама, осторожно промыв его раствором обесцвечивателя. Держите предметное стекло под углом и по каплям добавляйте раствор для обесцвечивания до тех пор, пока он не начнет бесцветно стекать с предметного стекла. Будьте особенно осторожны на этом этапе, чтобы добиться правильного окрашивания спор.
    5. Осторожно промойте предметное стекло холодной водой, чтобы удалить избыток обесцвечивающего раствора.
  3. Выполните хромотропное окрашивание следующим образом:
    1. Поместите предметное стекло в нагретое (от 50 ° до 55 ° C) хромотропное пятно минимум на 1 минуту. Для срезов ткани увеличьте время на 30 секунд.
    2. Промыть в 90% кислотном спирте от 1 до 3 секунд. Будьте особенно осторожны на этом этапе, чтобы добиться правильного окрашивания спор.
    3. Промыть в 95% этаноле в течение 30 секунд.
    4. Промыть дважды, каждый раз по 30 секунд, в 100% этаноле (для этого шага требуются два отдельных контейнера).Дайте высохнуть, а затем установите Cytoseal60 (Stephens Scientific) или другой подходящий герметик, следуя инструкциям. Для срезов тканей мы рекомендуем перед монтажом слайды кратко промыть в растворе 50% этилового спирта / 50% ксилола в течение 15 секунд.
Контроль качества:

Контрольный слайд спор микроспоридий из 10% образца, консервированного в формалине, должен быть включен для каждого цикла окрашивания.

В пробах фекалий споры микроспоридий должны появляться в виде темных пятен фиолетово-яйцевидных структур на бледно-зеленом фоне.Дрожжевые клетки, если они присутствуют, должны окрашиваться либо в темно-фиолетовый, либо в розовато-красный цвет, и их легко отличить от спор микроспоридий.

В цитологических препаратах споры микроспоридий должны окрашивать темно-фиолетовый в розовый цвет и могут содержать грамположительные гранулы. Иногда споры демонстрируют заметную экваториальную полосу в виде пояса.

Ссылка:

Moura H, Schwartz DA, Bornay-Llinares F, et al 1997. Новая и улучшенная методика «Quick-Hot Gram-Chromotrope», которая дифференциально окрашивает споры микроспоридианов в клинических образцах, включая срезы тканей, встраиваемые в парафин.Arch Pathol Lab Med.121: 888-893.

Модифицированная методика окрашивания сафранином (горячий метод)

Для Cyclospora , Cryptosporidia и Cystoisospora видов:

Ооцисты Cyclospora в клинических образцах обычно демонстрируются с использованием модифицированного кислотостойкого окрашивания (холода). Тем не менее, с помощью этой техники ооцисты окрашиваются по-разному: от неокрашенного до полного окрашивания, что ведет к возможной ошибочной идентификации. Модифицированный метод сафранина обеспечивает более равномерное окрашивание этих ооцист.Пятно необходимо нагреть до кипения с помощью горячей плиты или микроволновой печи.

Образец:

Можно использовать концентрированный осадок свежего или консервированного в формалине стула. Другие типы клинических образцов, такие как дуоденальная жидкость, также могут быть окрашены.

Реагенты:
Эта процедура состоит из трех этапов, требующих следующих решений:

  1. Кислотный спирт (3% HCL / метанол): медленно добавьте 3 мл соляной кислоты к 97 мл абсолютного метанола.Хранить при комнатной температуре в плотно закрытой таре.
  2. окраска Safranin (доступный в наборах окраски Gram)
  3. 3% малахитовый зеленый: растворить 3 г малахитового зеленого в 100 мл дистиллированной воды. Хранить при комнатной температуре.
Процедура:
  1. Подготовить тонкий мазок на предметном стекле и высушить на предметном стекле.
  2. Исправить в кислотном спирте на 5 минут.
  3. Промыть дистиллированной водой.
  4. Место в кипящем сафранине на 1 минуту.
  5. Промыть дистиллированной водой.
  6. Контрастин с малахитовой зеленью в течение 1 минуты.
  7. Немного промыть дистиллированной водой.
  8. Высушите слайд и закрепите покровным стеклом, используя желаемый монтажный материал.
Контроль качества:

Контрольный слайд Cyclospora spp. из 10% образца, консервированного в формалине, следует включать в каждый цикл окрашивания. Cyclospora spp. ооцисты будут красновато-оранжевого цвета. Фон должен равномерно окрашиваться в зеленый цвет.

Процедура окрашивания трихрома

Общепризнано, что окрашенные фекальные пленки являются единственным наиболее продуктивным средством исследования кала на кишечные простейшие.Мазок с постоянным окрашиванием облегчает обнаружение и идентификацию кист и трофозоитов и обеспечивает постоянную регистрацию встречающихся простейших. Маленькие простейшие, пропущенные при влажных исследованиях (неконцентрированных или концентрированных образцов), часто видны на окрашенном мазке. Техника Уитли Трихрома для образцов кала является модификацией оригинальной процедуры окрашивания тканей Гомори. Это быстрая, простая процедура, которая производит равномерно хорошо окрашенные мазки кишечных простейших, клеток человека, дрожжей и артефактов.

Образец:

Образцы, как правило, состоят из свежего стула или стула, зафиксированного в поливиниловом спирте (PVA), намазанного на предметных стеклах микроскопа и высушенного на воздухе на предметном стекле при температуре 60 ° C. Стул, консервированный в ацетате натрия-уксусной кислоте-формалине (SAF) или некоторых фиксаторах из одной пробирки, также может быть использован.

Реагенты:

Эта процедура состоит из семи этапов, требующих следующих решений:

  1. 70% этанол плюс йод: приготовьте маточный раствор, добавив кристаллы йода до 70% спирта, пока не получите темный раствор.Для использования разбавьте бульон 70% -ным спиртом, пока не получите темно-красновато-коричневый цвет или насыщенный чайный цвет.
  2. 70% этанол (дважды)
  3. Trichrome Stain: можно приобрести в продаже
  4. 90% Кислота Этанол
    90% Этанол 99,5 мл
    Уксусная кислота (ледниковая) 0,5 мл
  5. 95% этанол
  6. 100% этанол (дважды)
  7. Заменитель ксилола или ксилола (дважды)
Процедура:
  1. Для мазков ПВА поместите предметное стекло в 70% этанол плюс йод на 10 минут.Для других фиксаторов, следуйте инструкциям производителя. Пропустите этап йода для консервантов, которые не содержат хлорид ртути.
  2. Поместите слайд в 70% этаноле на 5 минут.
  3. место во втором 70% этаноле в течение 3 минут
  4. Поместить в трихромное пятно на 10 минут.
  5. Destain в 90% этаноле плюс уксусная кислота в течение 1-3 секунд.
  6. Промыть несколько раз в 100% этаноле.
  7. Место в двух сменах 100% этанола по 3 минуты каждая.
  8. Поместите в две смены ксилола или заменителя ксилола на 10 минут.
  9. Крепление с помощью покровного стекла с помощью монтажного материала (например, перманента).
  10. Изучите мазок под микроскопом, используя объектив 100 ×. Изучите не менее 200–300 нефтяных иммерсионных месторождений.
Контроль качества:

Контрольный слайд известного простейшего, такого как Giardia spp. от PVA сохраненный образец должен быть включен с каждым запуском окрашивания. Когда мазок тщательно зафиксирован и пятно выполнено правильно, цитоплазма протозойных трофозоитов будет иметь сине-зеленый цвет, иногда с фиолетовым оттенком.Кисты имеют тенденцию быть немного более фиолетовыми. Ядра и включения (хроматические тела, эритроциты, бактерии) и кристаллы Шарко-Лейдена имеют красный цвет, иногда окрашенный в пурпурный. Гликоген растворяется растворителями и появляется как чистая область в организме. Фоновый материал обычно окрашивается в зеленый цвет, обеспечивая хороший цветовой контраст с простейшими.

Calcofluor Белая процедура окрашивания

Этот хемофлуоресцентный метод полезен для обнаружения микроспоридий, Acanthamoeba spp., Pneumocystis jiroveci и Dirofilaria spp. Хемофлуоресцентные агенты, такие как Calcofluor, Fungi-Fluor или Uvitex 2B, также известные как оптические отбеливатели, являются быстрыми и недорогими скрининговыми агентами. Эти реагенты чувствительны, но неспецифичны, так как многие предметы и организмы, кроме паразитов, могут флуоресцировать. Этот тест следует использовать как инструмент быстрого скрининга, а не для идентификации видов.

Образец:

Готовят тонкий мазок, используя примерно 10 мкл свежих или консервированных образцов на предметном стекле.Образцы могут включать стул, мочу, культуру или другие типы образцов. Подогревайте на предметном стекле при 60 ° С до полного высыхания (5-10 минут).

Реагенты

Эта процедура состоит из двух этапов, требующих следующих решений:

  1. Абсолютный метанол
  2. 0,01% белый реагент калькофлюор: приготовить 0,01% раствор в 0,1 М трис-буферном солевом растворе, рН 7,2

Процедура

  1. Подготовьте тонкий мазок из фекалий, культур или другого материала для образца.
  2. Зафиксируйте мазок в метаноле на 30 секунд.
  3. Пятно с 0,01% кальцийфлюор белого реагента в течение 1 минуты.
  4. Промыть дистиллированной водой и дать мазку высохнуть.
  5. Крепление с накладкой толщиной 1.
  6. Осмотрите с помощью УФ-флуоресцентного микроскопа, оборудованного синим фиолетовым фильтрующим кубиком с длиной волны 400 нм или менее.
  7. Для скрининга на микроспоридию исследуйте мазок с 50-кратным или 100-кратным масляным объективом. Споры микроспоридий флуоресцируют блестящим сине-белым цветом на черном фоне.
Контроль качества

Контрольный слайд микроспоридии, сохраненный в 10% формалине, приготовленном из культуры или из образца кала, должен быть включен в каждый цикл окрашивания.

Для получения дополнительной информации о окрашивании образцов стула, позвоните в Отдел паразитарных болезней по телефону (404) 418-4110.

,

Комплексный анализ кала - The Great Plains Laboratory, Inc.

ОБЩИЕ СВЕДЕНИЯ

Комплексный анализ кала обнаруживает присутствие патогенных микроорганизмов, таких как дрожжи, паразиты и бактерии, которые вызывают хронические заболевания и неврологические нарушения. Он предоставляет полезную информацию о рецептах и ​​натуральных продуктах, эффективных против определенных штаммов, обнаруженных в образце. Тест также оценивает полезные уровни бактерий, иммунную функцию кишечника, общее состояние кишечника и маркеры воспаления.

Многие хронические нарушения возникают из-за проблем с пищеварением и недостаточного усвоения питательных веществ. Надлежащая желудочно-кишечная функция необходима для устранения токсических веществ, патогенных микробов и непереваренных частиц пищи из организма, чтобы предотвратить проблемы со здоровьем. Питательные вещества требуют, чтобы определенная внутренняя среда была должным образом переварена и транспортирована по всему телу.

Широко известно, что патологические кишечные микроорганизмы в желудочно-кишечном тракте вызывают заболевание. Исследования показывают связь между желудочно-кишечным трактом и неврологической, печеночной и иммунной системами.Например, избыточные дрожжи производят токсичные вещества, которые могут проходить через гематоэнцефалический барьер и изменять неврологическое функционирование, вызывая «мозговой туман», проблемы с поведением и трудности в обучении.

КОМПЛЕКСНЫЙ АНАЛИЗ СОСТОЯНИЯ ВКЛЮЧАЕТ:

ПРЕИМУЩЕСТВА КОМПЛЕКСНОГО АНАЛИЗА СОСТОЯНИЯ:

  • Количество полезных бактерий в желудочно-кишечном тракте определено

  • Пищеварительные параметры помогают при диагностике кишечной инфекции без функции кишечника.

  • Маркеры воспаления и иммунитета помогут при соответствующем лечении.

  • Потенциально можно выделить и идентифицировать многие различные патогенные микроорганизмы.

ТРЕБОВАНИЯ К ОБРАЗЦАМ:

Стул: Образец должен быть собран в два отдельных дня (в с интервалом не менее 12 часов).Образец должен быть получен в течение 7 дней с момента первого сбора. Пациент должен отказаться от пищеварительных ферментов, антацидов, железосодержащих добавок, витамина С более 250 мг, аспирина, противовоспалительных средств и большого количества мяса за 48 часов до сбора образца.

CPT КОДЫ:

.

Смотрите также